葉綠素是植物葉片光合作用的主要光合色素，必不可少。葉綠素含量的測定是實驗室的重要項目之一，如采用化學(xué)方法Arnon法，分光光度計法，葉綠素測定儀等，不一而足。迄今為止，在實際應(yīng)用中，我們通常采用葉綠素測定儀，因為其方便快捷，而且度高，方便攜帶。受到廣泛農(nóng)業(yè)工作者、科研院所的青睞。
分光光度計法測定結(jié)果準(zhǔn)確可靠，但是在測定時需要損傷葉片和組織，不利于對植株的系統(tǒng)研究。葉色值反映了植物葉片的綠色程度，與葉綠素含量存在一定的相關(guān)性。葉綠素測定儀是一種專門用于測定植物葉綠素含量的儀器，該儀器有多家廠商生產(chǎn)銷售，云飛科技也葉綠素含量測定儀的銷售工作。葉綠素測定儀的測定原理是：測量葉子在紅**域和近紅外區(qū)域的吸收率。通過這兩部分區(qū)域的吸收率，來計算出一種SPAD值，它是用數(shù)字來表示目前和葉子中葉綠素含量相對應(yīng)的參數(shù)。因為葉綠素在藍(lán)**域(400—500nm)和紅**域(600—700nm)范圍內(nèi)吸收達(dá)到了峰值，但在近紅外區(qū)域卻沒有吸收。另外，葉綠素含量測定儀還具有反應(yīng)氮元素含量的作用。
玉米葉綠素含量的測定有兩種方法。葉綠素測定儀法：利用葉綠素測定儀于花期對玉米功能葉片中部進(jìn)行活體測定。每個材料取3個葉片，后求平均值。分光光度計法：將葉綠素測定儀法測定完的葉片取回進(jìn)行分光光度計法測定。用毛刷刷去表面雜質(zhì)，用水沖洗，擦干，備用。每個葉片在中部用直徑9 mm打孔器打孔，取6個圓形葉片，稱重后放于15 mL試管，用10 mL95%乙醇避光浸泡96 h，浸泡過程中每天混勻2次，葉片完全變白后進(jìn)行比色，于665、649、470 nm波長測量光密度值，計算葉綠素含量，取3個葉片的平均值作為該材料的含量值。計算公式為：CA=13.95D665-6.88D649;CB=24.96D649-7.32D665;C其它=(1000D470-2.05CA-114.8CB)/245。
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